Tip:
Highlight text to annotate it
X
Dans la quatrième étape, nous allons inverser nos initiales de réticulation des protéines à l'ADN, suivie par
purification de l'ADN. Commencez par prendre chaque échantillon IP ainsi que l'échantillon d'entrée qui
ne passent pas par les étapes précédentes et propriété intellectuelle ajouter 8 microlitres de 5 sodium molaire
chlorure de 200 échantillons microlitre suivis par vortex.
Incuber à 95 degrés Celsius pendant 15 minutes. Pour purifier chaque échantillon, nous allons utiliser des colonnes de silice ADN de liaison selon
aux instructions du fabricant. D'abord ajouter chaque échantillon pour les quantités appropriées
de liaison à l'ADN dans un *** vortex, puis transférer chaque échantillon à une colonne placée à l'intérieur d'un
tube de collecte. Centrifuger les colonnes à 15.000 g pendant 1 minute.
Jeter le débit à travers le tube de collecte et ajouter un *** de lavage d'ADN de chaque colonne.
Centrifuger les colonnes à 15000g pendant une minute. Jeter le débit à travers le tube de collecte
et faire tourner les colonnes vides à 15000g pendant deux minutes pour vous assurer vous qu'ils sont complètement secs.
Jeter le tube collecteur usagée et placez la colonne de purification dans un nouveau tube propre.
Ajouter 50 microlitres de *** élution d'ADN directement à la membrane dans la colonne.
Laisser reposer pendant une minute, puis effectuer un essorage final à 15000g pendant 1 minute.
Jeter la colonne de purification et d'économiser de l'ADN purifié à -20 degrés Celsius avant d'être prêt pour la dernière phase.